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全自动核酸提取仪的洗脱和洗涤有什么区别?

发布时间:2022-06-16浏览:327次
  全自动核酸提取仪可以进行液体分液、吸液等自动完成,甚至能通过整合扩增、检测等功能,实现标本提取、扩增、检测全自动化。提取核酸只是其功能的一个应用。
 
  全自动核酸提取仪可以应用在疾病控制中心、临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、畜牧业和分子生物学研究等多种领域。以磁珠为载体,利用磁珠在高盐低PH值下吸附核酸,在低盐高PH值下与核酸分离的原理,再通过移动磁珠或转移液体来实现核酸的整个提取纯化过程。


 

在核酸检测实验室拿到样本之后,进行核酸检测时,首先要做的就是使用自动核酸提取仪将样本中的核酸提取出来,提取出的核酸直接关系到后续的检测,一般核酸提取的主要步骤分为四步:裂解、吸附、洗涤和洗脱,每一步出现问题都会影响磁珠的提取效率。
 
  洗涤是去除DNA以外的RNA、蛋白质等杂质。关系到核酸的纯度,磁棒的振荡幅度和混合时间会影响洗涤效率。磁棒振荡幅度太小或混合时间太短,有杂质残留在磁珠上会影响磁珠吸附核酸的能力。振荡太剧烈或时间太长,会丢失部分核酸或造成核酸的断裂、降解,得率下降。
 
  洗脱是解离吸附在磁珠上的DNA,得到纯度和浓度均很高的DNA,直接影响核酸得率,影响洗脱效率的因素有磁珠的干燥程度以及洗脱温度和时间。磁珠未充分晾干,可能会有醇类等杂质残留,影响后续PCR反应。
 
  磁珠过分干燥,核酸可能会干结在磁珠上,导致洗脱效率下降。适当提高洗脱温度和时间,有利于核酸从磁珠上游离下来,时间过长或温度过高,核酸有可能会降解,需要把握其中的平衡。

联系电话:
020-39921409

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