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光片扫描显微镜能对大样本进行观测吗?

发布时间:2022-06-14浏览:21次
  光片扫描显微镜的基本光学布局与传统显微镜有很大不同,但它相对来说更加直接。检测路径大致与宽场荧光显微镜相同:检测物镜收集从其焦平面射出并通过滤光片的光,然后管透镜再将光投射到相机芯片上。
 
  由于不需要在检测路径中引入激发光,所以不需要二色镜。不寻常的是照明路径与检测路径正交,主要由相干光源和光学元件组成的照明路径形成光片并通过照明透镜将其投射到样本上。
 
  对光片扫描显微镜性能至关重要的是光片的特性,比如光片的厚度、均匀性和穿透散射组织的能力。理想情况下,如果一片光只照亮检测物镜的焦平面,就会得到一个非常薄的光学切面,同时该光片要尽可能薄且能均匀穿过整个视野范围。
 
  光片显微镜的基本结构是结合了两条相互正交的不同光路,一条用于快速宽视场的检测,另一条通过一片薄光片用于照明。一般来说,光片处于检测路径的焦平面上,光片的束腰处于视野的中间,在使用静态光片时整个视野可以同时被照亮,从而使每条线的功率大大降低并且可以不受扫描镜速度的限制获得更高的速度,而仅受相机速度的限制。
 
  如果配合更快且灵敏度更高的相机,光片显微镜获取非常大的图像数据组的能力会比其他任何技术都快得多,同时仍然保证了信噪比和光毒性。光片照明在对大样本进行成像时用低NA、低放大率和长工作距离物镜的显微镜尤其有利。在光片显微镜的横向分辨率与宽场荧光显微镜相同时,轴向分辨率主要由光片厚度决定。

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