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全自动核酸纯化仪在分子克隆技术中的应用

发布时间:2022-03-16浏览:96次
  全自动核酸纯化仪是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器,核酸提取仪分为两类:一类是大型的自动化的,一般称为自动液体工作站;另一类是小型自动核酸提取仪,利用封装好的配套试剂自动完成提取纯化过程。
 
  大型自动液体工作站因为设备成本高昂,运行成本高,适合一次提取几千个同一种类标本,所以得到应用的比较少;而小型自动化的仪器,因为仪器设备和运行成本低,操作方便得到越来越多的应用。
 
  核酸是生命的基本物质之一,可分为DNA和RNA两类,广泛存在于动物、植物细胞、微生物等所有生命体内。不仅起着储存和传递遗传信息的作用,而且在蛋白质的生物合成上也占重要位置,因而在生长、遗传、变异等一系列重大生命现象中起决定性的作用。
 
  核酸提取包括DNA提取,RNA提取,质粒提取。核酸是遗传信息的携带者,是基因表达的物质基础,是分子生物学研究的主要对象。无论是进行核酸的结构还是功能研究,首先都需要对核酸进行提取和纯化。
 
  在分子克隆的所有操作中,基本的操作是核酸的纯化。其关键步骤是去蛋白质,通常只要用酚/氯仿。氯仿抽提核酸的溶液即可。每当需要把克隆有某一些所用的酶灭活或去除以便进行下一步时,可进行这种抽提。
 
  然而,如要从细胞裂解液等复杂的分子混合物中纯化核酸,则要先用某些蛋白水解酶消化大部分蛋白质后,再用有机溶剂抽提。这些蛋白酶包括链霉蛋白酶及蛋白酶K等,它们对多种天然蛋白均有活性,用酚氯仿抽提:这两种有机溶剂合用,比单独用酚抽提的除蛋白效果更佳。继而用氯仿抽提则可除去核酸制品中的痕量酚。当然,你也可以使用全自动核酸纯化仪来简化你的工作。

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