光片扫描显微镜和荧光探针的应用

　　光片扫描显微镜不是简单成像的显微镜，而是可以用于在原子、分子尺度进行加工和操作的工具。扫描探针显微镜的应用领域是宽广的，无论是物理、化学、生物、医学等基础学科，还是材料、微电子等应用学科都有用武之地。

 

　　光片扫描显微镜的基本原理是基于量子隧道效应。当针尖和试样面间距离足够小时(<0.4nm)，在针尖和试样面间施加一偏置电压，便会产生隧道效应，电子在针尖和试样面之间流动，形成隧道电流。

 

　　钙比率探针在溶液中均有荧光，测量时须洗去细胞外液探针，而进入细胞后的探针其AM被分解后不能透出质膜。由于这些探针要用紫外激发光作激发光源，会造成细胞的损伤，还会增加潜在的自发荧光，而且荧光发射峰波长也较短，须提高发光强度，因而其使用受到一定的限制。

 

　　膜电位荧光探针根据其对膜电位变化反应速度的快慢分为快、慢两类探针，各类均有10多种。DiBAC4(3)为常用的膜电位荧光探针，DiBAC4(3)为带负电荷的阴离子慢反应染料。该探针本身无荧光，当进入细胞与胞浆内的蛋白质结合后才发出荧光，测量时要求细胞浸在荧光染料中。

 

　　细胞内活性氧基活性氧可影响细胞代谢，与蛋白质、核酸、脂类等发生反应，有些反应是有害的，因此测量活性氧在毒理学研究中有一定的意义。根据检测活性氧的不同可选择不同的荧光探针。

 

　　由于某些毒性物质尤其是促癌物可影响缝隙连接介导的物质运输，因此该方法也可用于鉴别对缝隙连接作用有潜在毒性的化学物质。