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组织研磨低温均质仪和手工液氮法研磨哪个更好?

发布时间:2021-12-21浏览:37次
  组织研磨低温均质仪推出至今,越来越多用户体验了其在组织DNA提取中相对于手工研磨的方便性及高效性,组织研磨低温均质仪与手工液氮法研磨后的新鲜组织样本在DNA提取、RNA提取性能方面的差异,评估均质仪的适用性。
 
  将10例FT样本分别用吸水纸吸干表面的水分后,称重后分装为2管/例,20mg±0.3mg/管。向离心管内加入300μl裂解液。将离心管放于液氮中,冷冻处理。
 
  液氮冷冻处理后的离心管固定于组织研磨低温均质仪适配器中,向离心管中加入2粒3mm磁珠。小心将适配器正确安装至均质仪上,设置研磨参数:5轮循环数,60s/轮,10s间隔。启动仪器,研磨组织。研磨后,再向离心管中加入300μl裂解液(裂解液总使用量为600μl)。
 
  取样本放于研钵中,加入液氮后迅速研磨。将组织粉末转移至离心管中,称重后向其中加入600μl裂解液。将上述分别使用两种研磨方法处理后的样本,使用DNARNA共提试剂盒同时提取DNA和RNA。使用微量分光光度计测定DNA、RNA的浓度及纯度。DNA提取后于-20℃保存,RNA于-80℃保存。
 
  均质仪处理与手工液氮研磨处理后提取FT的DNA、RNA在浓度、纯度上均无显著性差异(成对检验P>0.05)。但手工研磨有较大的样本损失率,对于DNA提取浓度较低的样品来说,均质仪可以做到样品0损失,在DNA提取上有着明显的优势,且手工处理的过程复杂、易交叉污染,操作所用时间等方面均不及均质仪,因此均质仪对于DNA提取工作相对于手工研磨处理有很大优势。

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