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如何用组织研磨低温均质仪研磨内脏及肿瘤细胞提取RNA

发布时间:2021-10-26浏览:31次
  组织研磨低温均质仪经过大量样品破碎测试后发现,动物组织样品相比其他样品更难破碎,特别是一些内脏组织、结缔组织、心脏肌肉组织、肺部组织,一般很难用手工或者常规组织匀浆仪彻底破碎。因为这些动物组织样品一般韧性较大,如果使用手工研磨或者组织匀浆仪,不仅一次处理量太少、易污染且难清洗,处理后的样品还不够均匀细致,达不到后续提取RNA等实验的要求。
 
  组织研磨低温均质仪实验流程:
 
  1.高温灭菌预处理6mm不锈钢研磨珠;
 
  2.将灭菌处理过的研磨珠与研磨管适配器置入液氮中同时进行预冷处理;
 
  3.将样品从液氮中取出,在研钵中切割成约4-5mm宽的样品小块。
 
  4.在2ml无菌圆底离心管(进口)中依次加入:预冷6mm研磨钢珠1颗、切好的样品块1块、预冷6mm研磨钢珠1颗。
 
  5.确保离心管中有2颗6mm研磨钢珠和1块样品块后,快速盖好管盖,对称放入预冷的2.0ml研磨管适配器孔槽中。
 
  6.将适配器固定在组织研磨破碎仪的两个摇臂上,设置转速1800rpm,时间120S(胰腺样品180S),一键开始研磨。
 
  8.研磨时间结束,卸载适配器取出离心管,在管中快速加入裂解液,然后按照后续RNA提取实验步骤操作。
 
  组织研磨低温均质仪一次性高速破碎多个内脏样品组织,不仅操作灵活方便,还能安全轻松地进行液氮冷冻研磨操作,保证了RNA提取等温度敏感性后续实验的顺利进行。此外,避免了样品间的交叉污染,省去了清洗仪器的繁琐工作,对于样品量巨大且需要无菌操作的实验,无疑大大提高了效率。

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