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全自动核酸纯化仪纯化核酸的步骤

发布时间:2021-08-05浏览:55次
   全自动核酸纯化仪选用磁棒吸附搬运核酸纯化方式,使用深孔反应板和磁棒套,搭配不同品种的磁珠法核酸提取试剂,一起操作1-96个样本,从血液、细胞、安排、病毒等多种样本中自动分离提取纯化DNA/RNA。仪器经过特制的磁棒吸附、搬运和释放磁珠,然后完结样本/磁珠/核酸的搬运,避免了液体处理进程,提高了自动化程度。
 
  全自动核酸纯化仪在裂解液裂解样本后,游离于裂解/结合液中的核酸被磁珠特异性吸附,经过磁棒及磁棒套配合,完结磁吸、搬运、释放和混合等动作使吸附核酸的磁珠与裂解/结合液分离,并在漂洗液孔将与磁珠非特异结合的各种杂质去除,后使核酸分子溶解于洗脱液中。
 
  全自动核酸纯化仪在分子克隆的所有操作中,基本的操作是核酸的纯化。其关键过程是去蛋白质,通常只要用酚/氯仿。氯仿抽提核酸的溶液即可。每当需要把克隆有某一些所用的酶灭活或去除以便进行下一步时,可进行这种抽提。但是,如要从细胞裂解液等复杂的分子混合物中纯化核酸,则要先用某些蛋白水解酶消化大部分蛋白质后,再用有机溶剂抽提。
 
  这些蛋白酶包含链霉蛋白酶及蛋白酶K等,它们对多种天然蛋白均有活性,用酚氯仿抽提:这两种有机溶剂合用,比单独用酚抽提的除蛋白作用更佳。继而用氯仿抽提则可除掉核酸制品中的痕量酚。
 
  1.核酸样品置有盖小离心管中,加入等体积的酚/氯仿。
 
  2.旋涡混匀管内容物,使呈乳状。
 
  3.12000×g室温离心15秒。
 
  4.水相移入另一离心管,弃去两相界面和有机相。
 
  5.重复过程1-4步操作,直至两相界面上见不到蛋白质停止
 
  6.按下述核酸浓缩法沉淀收回核酸。

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