咨询热线
18588533298
NEWS/ 公司新闻
首页  >  公司新闻  >  光片扫描显微镜比共聚焦激光扫描显微镜好在哪?

光片扫描显微镜比共聚焦激光扫描显微镜好在哪?

发布时间:2021-07-27浏览:50次
   光片扫描显微镜的基本结构是结合了两条相互正交的不同光路,一条用于快速宽视场的检测,另一条通过一片薄光片用于照明。一般来说,光片处于检测路径的焦平面上,光片的束腰处于视野的中心。
 
  光片扫描显微镜利用照明与检测物镜相互正交,样品置于两个物镜焦平面的相交处,样品的其中一小片会被一片薄薄的激光光片所照亮。光片束腰应在视野的中心位置且与检测路径的焦平面完全重合。
 
  光片照明
 
  选择平面照明显微镜的特殊结构解决了单镜头结构的两条基本限制:
 
  1、在低数值孔径(NA)的物镜中获得很薄的光学切面是非常困难的;
 
  2、在对样品的单个区域进行成像时整个样品都处于被激光照亮的状态,这会增加数倍荧光漂白和光毒性的可能:在获取样品的N个平面信息的同时,每个平面都在激光下曝光了N次。
 
  相比之下,在SPIM中,只有检测物镜的焦平面被选择性地照亮,这能有效使得样品接收的激光能量输入减少。在获取N个平面的信息时每个平面也只会曝光一次。光片的厚度决定了轴向光学切面(XY面)的厚度,然而SPIM的光片厚度比普通显微镜技术中检测物镜的景深要薄得多。因此,通过光片显微镜,我们可以在大样本中获得大视场且薄的光学切片。
 
  与共聚焦激光扫描显微镜相比,光片扫描显微镜有许多显著优势:
 
  1、在使用共聚焦显微镜时,即使只成像单个平面,整个样品也会被均匀得被激光照亮;
 
  2、在使用光片显微镜时只有检测的目标平面才会被选择性地照亮;
 
  3、在使用共聚焦显微镜时,激光检测点需要扫遍整个样本后获得一张图像;
 
  4、在使用光片显微镜时,整个视野范围同时检测从而可以在短时间内获得一张图像;
 
  5、在光片显微镜的横向分辨率与宽场荧光显微镜相同时,因为光片照明技术,光片显微镜的轴向分辨率会显著提升(在10×/0.3的镜头下,分别可以达到共聚焦显微镜与宽场荧光显微镜的2倍与2.5倍)。

联系电话:
020-39921409

微信扫一扫