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组织研磨均质仪用于提取小鼠皮肤的DNA的具体步骤

发布时间:2021-11-18浏览:35次
  组织研磨均质仪是实验室样品制备常用工具,它通过碳化钨小球或不锈钢小珠在样品管内来回震荡实现样本的粉碎、混合、均化以及细胞破碎等,可以对硬性、软性、弹性等样品进行快速的粉碎和均相化处理,符合理化分析实验室的要求,配置不同体积、不同材料的研磨罐,可以进行干磨、湿磨及冷冻研磨,也可以进行细胞破碎和DNA/RNA提取,在农业、生物医药、食品、质检、高校等各行各业都有广泛的应用。
 
  组织研磨均质仪是实验室常见的仪器,很多实验人员知道组织研磨均质仪可以用来研磨组织用来提取DNA,但是具体的实验步骤却摸不清头脑,今天我就拿研磨仪通过小鼠皮肤提取DNA来做个示范,不懂实验步骤的要拿笔好好记一下了。
 
  实验步骤:
 
  1、在2ml圆底离心管单管放入小鼠皮肤样品40-50mg;
 
  2、在离心管中加入5mm硬质不锈钢研磨珠1颗,盖好管盖,装入鼎昊源TL1000自动研磨仪适配器中;
 
  3、将装有样品的适配器浸入液氮中;
 
  4、待液氮不沸腾后取出,迅速安装上机,采用间歇研磨方法;
 
  5、间歇研磨参数设置为转速2000rpm,每次自动研磨1分钟,间歇10s,循环4-5次效果好,从胶图看RNA浓度较高;
 
  6、研磨结束后,将离心管取出,每管加入裂解液(Trizol)0.5ml,之后进行离心、纯化等,做后续RNA提取实验。
 
  根据我的试验经验,使用研磨仪研磨小鼠皮肤,参数设置转速大于1600rpm,其他设置均采用以上案例中设定不变,都可以成功研磨并提取RNA。不过采用案例中的方法自动研磨效果好。

联系电话:
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