数字PCR仪是一种新的绝对定量PCR,主要是对PCR反应物进行有限稀释,随后在不同的反应腔室里进行PCR扩增,最后根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例得出靶分子的起始拷贝数或浓度的技术。 数字PCR仪技术特点:
1、绝对定量,不依赖Ct值,无需标准曲线;
2、超高灵敏度,适用于稀有序列及稀有突变的检测;
3、精准的定量结果和好的重复性;
4、适用复杂样品检测,不易受PCR抑制物影响。
核心优势:
1、高灵敏度——数字PCR的灵敏度与同体积反应体系的分割份数成正比;
2、分辨率——低至0.1倍基因表达差异;
3、绝对定量——根据每个微滴所含平均拷贝数以及泊松分布进行计算,从而得出检测样本的绝对拷贝数,同时无需依赖标准曲线。

数字PCR仪适用范围:
1.检测下限低至单拷贝,可应用于:
致病微生物检测/病毒载量鉴定(HIV、MRSA、CT-DNA等)
环境样本检测(水、空气样本等)
microRNA检测
单细胞基因表达分析
生物制品宿主DNA残留检测
2.可在复杂样品中检测特定靶标序列,可应用于:
癌症标志物检测(KRAS/BRAF/HER2/EGFR)
基因组变异检测(SNP/SNV)
线粒体突变检测
3.数字PCR仪可得到更精确的定量结果,可应用于:
病毒载量鉴定(制药、临床药效评估及愈后监控)
CRMCs标定分子标准品和对照品的生成
CNV(拷贝数变异)分析鉴定
NGS测序文库的绝对定量
差异基因表达分析