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数字PCR仪实现了定量及稀有等位基因的检测

发布时间:2021-04-07浏览:18次
  数字PCR仪是一种核酸检测和定量分析的新方法,可以作为传统实时定量PCR的替代方法,以实现一致定量及稀有等位基因的检测。数字PCR的工作原理在于将DNA或cDNA样品分割为许多单独、平行的PCR反应,部分这些反应包含了靶标分子(阳性),而其他不包含(阴性)。单个分子可以被扩增一百万倍或更多。在扩增期间,TaqMan化学试剂及染料标记探针可用于检测特定序列的靶标。当不存在任何靶标序列时,没有信号累积。PCR分析后,阴性反应片段用于生成样品中靶标分子的一致计数,而无需标准品或内标。
  纳流芯片的使用提供了便捷和直观的机制来同时平行运行上千个PCR反应。每个孔都加入了样品、扩增混合物和TaqMan测定试剂的混合物,然后进行单独分析以检测存在(阳性)或不存在(阴性)终点信号。考虑到孔可能接收到多个靶标序列分子,使用泊松模型应用了一个校正因子。
  数字PCR仪和试剂能够提高现有TaqMan测定的性能,从而实现更高的灵敏度、精度和一致定量,使应用从中获益。
  PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内InVitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。在使用PCR仪的过程中需要注意以下事项:
  1)环境要恒定,运作环境的温度不能过高或过低,在用空调的房间使用,有些PCR仪有温度保护程序,在过低的温度下机器不能启动。
  2)电源要稳定,工作的电压不能波动过大,波动过大会造成电子器件损坏,一般建议将PCR仪电源接于稳压电源上。
  3)尽量不要保存过夜,能经常使用就不容易坏。
  4)数字PCR仪在使用前要详细阅读使用说明书,遇到不能解决的问题不要随意拆卸仪表,打电话咨询厂家或技术支持部门,通过指导进行维修。

联系电话:
020-39921409

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